斑马鱼行为篇（56）：环境雌激素影响雄性斑马鱼繁衍行为

  环境雌激素(environmental estrogens，EES)是指环境中存在的可搅扰动物内源激素组成、排泄、运送、结合、代谢等进程，激活或按捺内排泄体系功用的类雌激素样物质。EES按本身性质可被分为天然雌激素和人工组成雌激素这2个大类。天然雌激素包含雌酮(estrone，E1)、雌二醇(17β-estradiol，E2)、雌三醇(estriol，E3)等，常见的人工组成雌激素则包含乙炔基雌二醇(17α-ethinylestradiol，EE2)、壬基酚(4-nonylphenol，4-NP)、双酚A(bisphenolA，BPA)等。EES来历多样、散布广泛且具有生物毒性；它还具有停留性、难降解等特性，在必定条件下可经食物链扩大或被生物富集于体内。很多研讨标明，EES终究会聚于水中，对水生生物形成极大影响。因而，EES对水生生物的影响已变成全球上内排泄搅扰研讨的热点问题之一。EES会引起形式动物斑马鱼雄性性激素水平反常并损坏产生，然后形成斑马鱼雄鱼生殖妨碍。更有研讨标明EES还会引起斑马鱼的神经功用妨碍，乃至导致斑马鱼逝世。

  鱼类的成功繁衍不只有赖于正常的配子产生，也有赖于男女之间的繁衍行为。鱼类的繁衍行为包含求偶、交配、育幼等一系列活动。繁衍行为由中枢神经体系和内排泄体系一起参加调控。有研讨发现，性激素如雌激素、雄激素等能以负反馈方法调理鱼类的中枢神经体系，进而对雄性繁衍行为如求偶、追逐、引导、交配等进行调控。现在，关于环境雌激素的研讨多集中于EES对鱼类配子生成的影响，但有关EES影响鱼类繁衍行为的研讨很少。斑马鱼的繁衍行为包含雌、雄鱼之间的身体触碰和追逐、雄鱼身体颤抖、对雌鱼进行引导、雌鱼产卵等。鱼类的繁衍行为与温度、光周期等环境因子严密相关。有研讨发现，较高剂量的持久性有机污染物如三丁基锡、菲、氨氮钳制、重金属等均能按捺斑马鱼雄性的繁衍行为。

  试验用AB系成年斑马鱼，雌、雄性斑马鱼各60尾于恒温体系中以(28±0.5)ºC、14h光照∶10h漆黑条件驯养30d。每2d运用溶解氧质量浓度为6.0～7.3mg∙L-1、pH为7.1～7.8的脱氯自来水替换1次驯养水体。每日9：00、15：00和21：00对试验鱼各喂养1次，每日总喂养量约为试验鱼体质量的2%。习惯完毕后，将雄性斑马鱼分为4个组，每组15尾；每组试验鱼放养于3个相同标准且装有20L脱氯自来水(其间含质量分数为0.001%的DMSO助溶剂）鱼缸中，每缸5尾试验鱼。4组试验鱼除1组作为对照组(水体中无EES)外，其他3组别离为EE2-low组(水体中含5.55ng∙L-1EE2)、EE2-high组(水体中含11.1ng∙L-1EE2)和EES组(水体中含62.2ng∙L-14-NP、250ng∙L-1BPA、4.56ng∙L-1E1、5.53ng∙L-1E2和39.6ng∙L-1E3)，总雌激素效应适当于水体中含5.55ng∙L-1EE2)。文献以为：淮河江苏段水体中的BPA、4-NP等EES为中高危险等级，已具有区域污染特征；可是现在又没有整个淮河流域环境剂量EES对鱼类长时刻影响的研讨。

  60d的EES处理完毕后，将各处理组中每尾雄性斑马鱼别离置于15个长×宽×高均为25cm×15cm×20cm参加3L脱氯自来水繁衍鱼缸中。每缸放入1尾未经EES露出的成年雌性斑马鱼与上述雄性斑马鱼进行繁衍配对：首要运用宽×高为15cm×8cm的带孔挡板对雌、雄性斑马鱼进行阻隔以阻挠它们身体触摸，并在鱼缸正上方固定数码相机，习惯过夜。然后在第2日6：00(雌、雄性斑马鱼已习惯环境16h)撤掉挡板，将装有产卵石且长、宽均为7cm的产卵盒置于鱼缸中一处固定方位作为产卵区，待斑马鱼习惯5min后用数码相机进行40min的视频拍照。对拍照5min后的接连30min视频片段做多元化的剖析并计算相关试验数据。研讨斑马鱼繁衍行为的计算目标有雌、雄性斑马鱼彼此追逐频次以及两者一起/独自进入产卵区域的时刻。

  鱼类的繁衍活动是一个杂乱的进程，两性正常的繁衍行为是繁衍成功的必要条件。本研讨结果为：与对照组比较，通过5.55ng∙L-1EE2长时刻露出后，尽管雄性斑马鱼的几项繁衍行为目标均无计算学意义上的改变，可是依然有削减趋势，可见上述较低剂量的EE2露出依然对雄性斑马鱼的繁衍行为产生了必定的按捺效果。此外，通过EES联合处理和11.1ng∙L-1EE2长时刻露出后雌、雄性斑马鱼彼此追逐频次与对照组比较有计算学意义上的削减，标明上述2种处理对斑马鱼的求偶行为有着十分显着的按捺效果。一起，EES组和EE2-high组雄性斑马鱼独自进入产卵区时刻及雌、雄性斑马鱼一起进入产卵区的时刻与对照组均呈现了计算学意义上的削减，标明这2种处理显着降低了雄性斑马鱼的繁衍志愿。EES联合处理和11.1ng∙L-1EE2的长时刻露出显着按捺了雄性斑马鱼的繁衍行为，且EES联合处理所产生的生殖毒性与11.1ng∙L-1EE2根本适当。环境剂量的EES联合处理可以显着危害雄性斑马鱼的繁衍行为。

  EE2和EES联合露出后对雌、雄性斑马鱼相互追逐频次与一起进入产卵区时刻的影响

  菲(PHE)短期露出对斑马鱼(Branchydanio rerio)繁衍行为及产卵、受精、孵化和仔鱼逝世率的影响[J]. 黄菲;胡莹莹;焦艳;牛翠娟.北京师范大学学报(自然科学版),2010(01)

  雌激素在斑马鱼产生中的效果及内涵机制[D]. 王雅琴.重庆师范大学,2020

  张盈盈,李英文,刘智皓.环境雌激素联合处理对雄性斑马鱼繁衍行为的影响[J/OL].重庆师范大学学报(自然科学版):1-5[2024-04-15].

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